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① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：人腦微血管內皮細胞

英文名稱：Human Brain Microvascular Endothelial Cells

組織來源：腦組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

人腦微血管內皮分離自腦組織；腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分，它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦，大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在腦血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。與外周內皮細胞相同，大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子，調控白細胞進入大腦。由于微血管內皮細胞的器官特異性，內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織。其主要特征如下：①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接，產生很高的跨內皮阻抗，延遲細胞旁的通量；②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構，其液相物質胞飲水平較低；③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運系統，從而產生“兩極分化"的表現型。

公司實驗室分離的人腦微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人腦微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

大鼠AMPA離子能谷酸受體1(GRIA1)檢測試劑盒 ，英文名： GRIA1 ELISA Kit

Human VLA (VLA) ELISA Kit 人遲現抗原(VLA)檢測試劑盒

GoatIerferonγ,IFN-γELISAKit 山羊γ干擾素(IFN-γ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforC3bR(HumanComplemefragme3brccptor)ELISAKit人補體片段3b受體

細菌脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒20次

rabbitthrombomodulin,TMELISAKit兔子血栓調節蛋白(TM)檢測試劑盒規格：96T/48T

IL12B重組人 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標簽) Protein

嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)重組蛋白 Recombinant Eosinophil Chemotactic Factor (ECF)

MMP26重組人 MMP-26 / Matrix metalloproteinase-26 蛋白 Protein

IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白

HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)重組蛋白 Recombinant Eosinophil Chemotactic Factor (ECF)

IL1R2 Protein Human 重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白

IL12B重組人 IL12B / P40 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

MMP26重組人 MMP-26 / Matrix metalloproteinase-26 蛋白 Protein

豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)檢測試劑盒

Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCXC-chemokinereceptor1,CXCR1檢測試劑盒人CXC趨化因子受體1(CXCR1)檢測試劑盒規格：96T/48T

組織ERK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanprocollagenⅢN-terminalpeptide，PⅢELISAKit人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測試劑盒規格：96T/48T

人腦微血管內皮細胞人組織轉谷酰胺酶(TGM2)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TGM2 (ansglaminase 2, Tissue) ELISA Kit

人表皮轉谷酰胺酶(TGM3)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TGM3 (ansglaminase 3, Epidermal) ELISA Kit

人白介素27(IL-27)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human IL-27 (Ierleukin 27) ELISA Kit

人轉化生長因子β3(TGF-β3)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human TGF-β3 (ansforming Growth Factor β3) ELISA Kit

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用