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細胞簡介：

小鼠大隱靜脈內皮分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內側端，經內踝前方，沿小腿內側緣伴隱神經上行，經股骨內側髁后方，進入大腿內側部，與股內側皮神經伴行，逐漸向前上，在恥骨結節外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點稱為隱股點。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內側淺靜脈和股外側淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時，須分別結扎、切斷各屬支，以防復發。大隱靜脈內皮細胞對維持大隱靜脈動態平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調節因子；大隱靜脈內皮細胞還釋放控制細胞增殖和調節血管壁緊張度的分子。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠大隱靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠大隱靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

總合成酶（NOS）測試盒[測總NOS（T－NOS）]

（NO）測定試劑盒（微板法）

（NO）測定試劑盒（還原酶法）

ATP酶測試盒（測普通組織勻漿的Na+K+、Ca2+Mg2+－ATP酶，樣本前處理不需高速離心）

豬組胺(HIS)ELISA 試劑盒

Human lipid peroxide / lactoperoxidase (LPO) ELISA Kit 人過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)試劑盒

RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforApo-E(MouseApolipoproteinE)ELISAKit小鼠載脂蛋白E

溴脫氧尿核苷(BrdU)溶液(1毫摩爾)1毫升

PorcineMelatonin,MTELISAKit豬褪黑素(MT)試劑盒

IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白 Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)

RCN3重組人 RCN3 蛋白 (His 標簽) Protein

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標簽)

GPT Protein Rat 重組大鼠 GPT1 / GPT 蛋白 (His 標簽)

癌胚抗原(CEA)重組蛋白 Recombinant Carcinoembryonic Antigen (CEA)

C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標簽)

BCAM重組小鼠 BCAM 蛋白 (His 標簽) Protein

FGFR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (His 標簽)

GSTZ1重組人 GSTZ1 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠大隱靜脈內皮細胞大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)試劑盒 ，英文名： NF-κB p65 ELISA Kit

Rabbit heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 兔熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒

麻疹病毒(MV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T

CLIAKitforMouseBeta-Defensins,Beta-DFELISAKit小鼠β-防御素

體液肌酸激酶(CK)總活性比色法定量試劑盒25次

ELISAKit1,3-βDglucosidase人1,3-βD葡葡糖苷酶

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。