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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔腹腔巨噬細(xì)胞

英文名稱：Rabbit Peritoneal Macrophage Cells

組織來源：腹腔液

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

兔腹腔巨噬分離自腹腔；腹腔，即軀干腹部的腔，內(nèi)襯腹膜，由體壁、橫膈膜和盆底圍成，其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對病原體作出反應(yīng)。巨噬細(xì)胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一；腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。

公司實驗室分離的兔腹腔巨噬采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的兔腹腔巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒   96T/48T

小鼠肌酸激酶(CK)試劑盒   96T/48T

小鼠肌肉素/肌抑素（MSTN）試劑盒   96T/48T

小鼠肌球蛋白(Myosin)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat alternative macrophage activation associated chemical factor 1 (AmAC-1) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)試劑盒

Humanai-matedciullinatedvimeinaibody,MCVELISAKit 人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAlanineAminoansferase,ALT/GPT試劑盒人轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物O-糖基糖蛋白化試劑盒5次

Mouse8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IFNGR1重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG; 0.5mgMAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽) Protein

DCXR Protein Human 重組人 DCXR / HCR2 蛋白

ART4 Protein Mouse 重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG; 0.5mgMAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)

DCXR Protein Human 重組人 DCXR / HCR2 蛋白

IFNGR1重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

ART4 Protein Mouse 重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽) Protein

兔腹腔巨噬細(xì)胞大鼠腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)試劑盒 ，英文名： CDNF ELISA Kit

Mouse oxidized low density lipoprotein aibody (OLAb) ELISA Kit 小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒

Ratproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGHRP(MouseGrowthHormoneReleasingPeptide)ELISAKit小鼠生長激素釋放多肽

細(xì)胞鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量試劑盒20次

Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAKit大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用