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本公司代理ATCC細(xì)胞，提供非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費(fèi)用售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說明書或價(jià)格信息，點(diǎn)擊了解更多其它源細(xì)胞。
細(xì)胞名稱  非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費(fèi)用
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 Vero-HCV-E2細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因，能穩(wěn)定表達(dá)E2蛋白，是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C40

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費(fèi)用在運(yùn)輸?shù)倪^程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要立即打開培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理；如若證實(shí)細(xì)胞無活力，請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費(fèi)用培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
1.收到非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費(fèi)用后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nifedipine（標(biāo)準(zhǔn)品）

質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nifedipine-d6-d6

質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nitrazineyellow硝氮黃

質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nifuroxazide硝呋酚酰肼；硝呋奇特

質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nifuroxazide硝呋酚酰肼；硝呋奇特(標(biāo)準(zhǔn)品)

質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nifuratel硝呋太爾

質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nifuratel硝呋太爾(標(biāo)準(zhǔn)品)

質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口NitrovinHCL,Difurazone硝呋烯腙鹽酸鹽

羥基酪醇CAS10597-60-1訂購|咨詢規(guī)格：20mg

二氫槲皮素CAS480-18-2訂購|咨詢規(guī)格：20mg

土鱉對(duì)照藥材CAS訂購|咨詢規(guī)格：1g

鼠尾草酚CAS5957-80-2訂購|咨詢規(guī)格：20mg

苯甲酰原堿CAS466-24-0訂購|咨詢規(guī)格：20mg

地骨皮對(duì)照藥材CAS訂購|咨詢規(guī)格：1g

香荊芥酚CAS499-75-2訂購|咨詢規(guī)格：50mg

去氫二異CAS訂購|咨詢規(guī)格：20mg

旋復(fù)花對(duì)照藥材CAS訂購|咨詢規(guī)格：1g

三丫苦CAS訂購|咨詢規(guī)格：20mg支

王不留行對(duì)照藥材CAS訂購|咨詢規(guī)格：1g
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費(fèi)用DRBCAgar250gDRBC瓊脂

DPDMedium250gDPD培養(yǎng)基

DoubleLactosePeptoneBroth10ml*20支/包雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（含小倒管）

DoubleLactoseBileMedium250g雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基

DoubleLactoseBileMedium250g雙料乳糖膽鹽（含中和劑）培養(yǎng)基

DoubleLactoseBileFermentBroth10ml*20支雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管（含小倒管）

Doubleanti-chocolateagar250g雙抗巧克力瓊脂