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產(chǎn)品名稱(chēng):3T3細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品特點(diǎn):3T3細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)上海莼試生物相關(guān)產(chǎn)品:20×SSPE PH7.4 100ml 瓶

Naphthol Blue Black 氨基黑10B 5g 瓶

Guanidine異硫氰酸胍 100g 瓶

Dopamine hydrochloride 5g 瓶

兔抗羊IgG-FITC 3ml 支

Shanzhiside methylester 山梔苷甲酯 64421

產(chǎn)品型號(hào):

更新日期:2021-04-01

訪問(wèn)次數(shù):856

3T3細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)的詳細(xì)資料:

下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息:

產(chǎn)品名稱(chēng)

3T3細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)

英文名稱(chēng)

3T3 cells, mouse fibroblast cells

貨號(hào)

EY-X64107

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
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培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

20×SSPE PH7.4 100ml  瓶

Naphthol Blue Black 氨基黑10B 5g  瓶

Guanidine異硫氰酸胍 100g  瓶

Dopamine hydrochloride 5g  瓶

兔抗羊IgG-FITC 3ml  支

Shanzhiside methylester 山梔苷甲酯 64421-28-9  20mg

SYBR Green I(PCR級(jí),10000X) 50ul  支

Delfinidol Chloride 化飛燕草素 528-53-0  1mg

植物基因組DNA提取試劑盒 50T  盒

Lysozyme 1g  瓶

兔抗馬IgG-HRP 0.1ml  支

GultathioneStransferases 轉(zhuǎn)移酶 1mg  瓶

3T3細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)白介素-1受體相關(guān)激酶2IRAK 2 0.5mg

白介素-1受體拮抗劑抗原IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide 0.5mg

整合素α7抗原Integrin a7(integrin alpha 7) 0.5mg

粘附分子整合素β1抗原integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 0.5mg

粘附分子整合素α5抗原Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 0.5mg

蛋白質(zhì)激酶JAK-1抗原JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 0.5mg

整合素αV抗原Integrin alpha V/CD51 peptide 0.5mg

蛋白質(zhì)激酶JAK-2抗原JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2) 0.5ml

磷酸化蛋白激酶JAK-2抗原phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008) 0.5mg

c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) 0.5mg

磷酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0.2ml

細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

 

 

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