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產(chǎn)品名稱:小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存

產(chǎn)品特點:了解更多小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存,相關(guān)資料如:說明書、培養(yǎng)條件、注意事項及售后可咨詢我們在線客服。收到細(xì)胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養(yǎng)基,不建議使用原瓶中運輸用培養(yǎng)基。

產(chǎn)品型號:

更新日期:2019-01-31

訪問次數(shù):689

小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存的詳細(xì)資料:


本公司代理ATCC細(xì)胞,提供小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說明書或價格信息,點擊了解更多小鼠源細(xì)胞。
細(xì)胞名稱  小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 B16-Fo是一株小鼠黑絲素瘤細(xì)胞系。它可在體外常規(guī)傳代培養(yǎng),產(chǎn)生高濃度的黑色素??捎糜诜肿由飳W(xué)中黑色素基因的表達(dá)研究。

培養(yǎng)條件 DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1:

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C24

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

?
小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存在運輸?shù)倪^程中,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產(chǎn)品的狀況,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要立即打開培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁,請試著用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺盼藍(lán)染色證實細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理;如若證實細(xì)胞無活力,請在收到貨后48小時內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項:
1.收到小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
?
質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級N-Stearoyldihydro-D-erythro-SphingosineN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇

質(zhì)量規(guī)格:BR,UV>30%N-tert-Butyl-α-phenylnitroneN-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))

質(zhì)量規(guī)格:BRBOC-L-MethionineN-叔丁氧羰基-L-

質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-Asn-(Xan)-OHN-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基-L-天

質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-TyrosineN-叔丁氧羰基-O-(2-溴芐氧羰基)-L-

質(zhì)量規(guī)格:38000~42000mpa.sN6-Cbz-L-LysineN-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸

質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRFmoc-Lys(Z)-OHN'-芴甲氧羰基-N-芐氧羰基-L-賴氨酸

質(zhì)量規(guī)格:>99%,5NN'-Nitro-D-arginineN'-硝基-D-

pKD1pRC250g

pKH3pRC/CMV250g

pKJE7PrecipitatedTMBChromogenicKit250g

pKK223-3批次1PrehybridizationSolutionsinSSC250g

pKK232-8PrehybridizationSolutionsinSSPE250g

pKK233-3PremixedAcr-BisPowder250g

pKLAC1PremixedAcr-BisPowder250g

pLacZPremixedBCIP/NBTSolution250g

pLAMBLA1305.2PreScissiomProtease250g

pLAPSNPrestainedProteinMarker250g

pLEGFP-C1PrestainedProteinMarker250g

pLEGFP-N1pRetro-Off250g

pAdTrackpRetro-On250g

pLEGFP-N2pRetro-on-EGFP250g

pLentG-KOSMpRetro-on-RFP250g
小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F0保存Caspase 2  半胱胺酸蛋白酶-2多克隆抗體     0.1ml

Caspase 4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4多克隆抗體     0.1ml

Caspase 4/Caspase 11  半胱胺酸蛋白酶4/11多克隆抗體     0.2ml

Caspase 5  半胱胺酸蛋白酶蛋白5多克隆抗體     0.1ml

Caspase 8  半蛋白酶8多克隆抗體     0.1ml

Caspase-1(actived P10)  天冬氨酸-特異性蛋白酶家族多克隆抗體     0.1ml

Caspase-10  半胱胺酸蛋白酶-10多克隆抗體     0.1ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

Caspase-13/4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-13多克隆抗體     0.2ml

caspase-3 p11  半胱天冬酶-3酶原多克隆抗體     0.1ml

caspase-3 p12 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3多克隆抗體     0.1ml

 

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