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本公司代理ATCC細(xì)胞，提供小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A運(yùn)輸售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書或價(jià)格信息，點(diǎn)擊了解更多小鼠源細(xì)胞。

細(xì)胞名稱  小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A運(yùn)輸
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 L-M(TK-) cells (ATCC CCL-1.3) 用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。 Wnt-3A基因編碼一個(gè)有變異的信號(hào)功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎發(fā)過(guò)程中的許多模式形成和生長(zhǎng)事件。 這些細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。 它們是目前Wnt-3A條件培養(yǎng)基的好來(lái)源。 由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對(duì)于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)有必要用其來(lái)源細(xì)胞株(ATCC CRL-
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A運(yùn)輸培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
1.收到小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A運(yùn)輸后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定LithiumlactateDL-乳酸鋰(>98%,BR)

質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRDL-TryptophanDL-

質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品DL-tert-LeucineDL-叔

質(zhì)量規(guī)格：VE含量≥260.00mg/gasdl-α-tocopherolDL-SerineDL-

質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,CPDL-ThreonineDL-

質(zhì)量規(guī)格：>98%DL-AsparticacidDL-天冬氨酸

質(zhì)量規(guī)格：>98%DL-AsparaginemonohydrateDL-天冬酰胺，一水

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品DL-SelenomethionineDL-硒代蛋氨酸(USP)

HMy2.CIR細(xì)胞株pCI2ug

HO-8910PM細(xì)胞株pCI-neo2ug

HO-8910細(xì)胞株pCLEco2ug

HOS細(xì)胞株pCL12ug

HP615細(xì)胞株pCL-Ampho2ug

HPAC細(xì)胞株pCMS-EGFP2ug

Hs578T細(xì)胞株pCMV/Myc/Mito2ug

HSC-T6細(xì)胞株pCMV/Myc/Nuc/GFP2ug

HT1080細(xì)胞株pCMV52ug

HT-29（RFP）細(xì)胞株pCMV5（noNdeI）2ug

HT-29細(xì)胞株pCMV5-3002ug

HuH-6細(xì)胞株pCMV5-Flag2ug

HuH-7細(xì)胞株pCMV5-HA2ug

HuT78細(xì)胞株pCMV5-Myc2ug

HuTu-80細(xì)胞株pCMV6entry2ug
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A運(yùn)輸ANKRD9  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9多克隆抗體     0.2ml

ANKS1A  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A多克隆抗體     0.2ml

ANKS1B/AIDA1  β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1多克隆抗體     0.2ml

ANKS3  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3多克隆抗體     0.2ml

ANKS6  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6多克隆抗體     0.2ml

Ankyrin B/Ankyrin brain  錨定蛋白B多克隆抗體     0.2ml

Ankyrin erythroid  紅細(xì)胞蛋白Ank1多克隆抗體     0.2ml

Ankyrin G  錨定蛋白G多克隆抗體     0.2ml

Annexin Ⅲ  膜粘連蛋白A3多克隆抗體     0.1ml

Annexin A1  膜粘連蛋白A1多克隆抗體     0.1ml

Annexin A10/14  膜粘連蛋白10多克隆抗體     0.1ml

Annexin A7  膜粘連蛋白7多克隆抗體     0.2ml

小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞；LWnt-3A運(yùn)輸在運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要立即打開培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過(guò)夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理；如若證實(shí)細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。