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三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。

小鼠B細(xì)胞活化因子（BAFF）DRGelisa試劑盒 Mouse BAFF ELISA Kit
BAFF DRGelisa試劑盒說明書【實(shí)驗(yàn)用途】B細(xì)胞活化因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF), B細(xì)胞活化因子是維持B細(xì)胞穩(wěn)態(tài)及體液免疫平衡的一種基本成分.它的異常可引起體液免疫失衡而誘發(fā)多種自身抗體的產(chǎn)生.多種自身免疫性疾病如干燥綜合征、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等,發(fā)病與B細(xì)胞活化因子的過表達(dá)密切相關(guān).B細(xì)胞活化因子與其受體有望成為治療自身免疫性疾病的一個(gè)新靶點(diǎn)。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)（biotin）標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
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操作流程：
（1）BAFF DRGelisa試劑盒說明書待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
試劑盒組成及試劑配制 ：
1.BAFF DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
NP40 Lysis Buffer（NP40裂解液）  *

NP40 Lysis Buffer，High Salt（高鹽型NP40裂解液）  *

NP40 Lysis Buffer，Low Salt（低鹽型NP40裂解液）  *

NP40 Permeating Solution in PBS,10X（NP40滲透液，10X）  *

NP40 Permeating Solution in TBS,10X（NP40滲透液，10X）  *

Nylon Membrane Stripping Buffer,10X（尼龍膜剝離緩沖液，10X）  *

Orange-G Loading Dye (6X, Glycerol based)  *

Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Ficoll based)  *

Orange-G/Blue Dye (6X,triple tracker,Glycerol based)  *

Para-formaldehyde fixative Solution  *

Para-formaldehyde in PBS with Mg++ and EGTA，4%  *

Para-formaldehyde in Phosphate Buffer  *
Bromocresol purple sodium salt分子式：C21H15BR2NAO5S分子量：562.20

Bromocresol purple分子式：C21H16BR2O5S分子量：540.24　　562.20

Bromocresol purple分子式：C21H16BR2O5S分子量：540.24　　562.20

Bromocresol purple分子式：C21H16BR2O5S分子量：540.24　　562.20

Bromofenoxim分子式：C13H7BR2N3O6分子量：461.02

Bromophenol blue sodium salt分子式：C19H9BR4NAO5S分子量：691.94

Bromophenol blue sodium salt分子式：C19H9BR4NAO5S分子量：691.94

Bromophenol blue sodium salt分子式：C19H9BR4NAO5S分子量：691.94

Bromophenol blue分子式：C19H10BR4O5S分子量：669.96

Bromophenol blue分子式：C19H10BR4O5S分子量：669.96

Bromophenol blue分子式：C19H10BR4O5S分子量：669.96

Bromophenol blue分子式：C19H10BR4O5S分子量：669.96

Bromophenol blue分子式：C19H10BR4O5S分子量：669.96

Bromophenol red分子式：C19H12BR2O5S分子量：512.17

Bromophenol red分子式：C19H12BR2O5S分子量：512.17

Bromophos-ethyl分子式：C10H12BRCL2O3PS分子量：394.05

Bromophos-methyl分子式：C8H8BRCL2O3PS分子量：366.00

Bromophos-methyl分子式：C8H8BRCL2O3PS分子量：366.00

Bromophos-methyl分子式：C8H8BRCL2O3PS分子量：366.00

Bromopropylate分子式：C17H16BR2O3分子量：428.12
BAFF DRGelisa試劑盒說明書體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-7）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次*

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-7）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次*

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-3）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次*

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-3）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次*

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒20次*

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）免疫捕獲檢測(cè)試劑盒20次*

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次*

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次*