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細胞簡介：

腹膜是指在存在高等脊椎動物腹腔中的一層漿膜，主要由間皮及其外面的結締組織構成。腹膜包覆大部分腹腔內的器官，能分泌黏液潤濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、和神經組織經由腹膜與外界相連。腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果。

微血管內皮細胞呈單層覆蓋于微血管表面，構成血管內外物質交換的一種重要屏障，是循環血流動力和血液中危險因素的主要靶點。

細胞特性：

1）組織來源于手術后的腹膜組織。

2）細胞鑒定：vWF與角蛋白熒光染色為陽性。

3）經鑒定細胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細胞生長方式：鋪路石樣細胞，不規則細胞，貼壁培養。

推薦培養基：

我們推薦使用 delf原代 內皮 細胞培養體系 作為該細胞的培養基。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

大鼠β-轉導重復相容蛋白(β-CP)檢測試劑盒 ，英文名： β-CP ELISA Kit

Mouse esadiol (E2) ELISA Kit 小鼠雌二醇(E2)檢測試劑盒

ELISA 小鼠基質金屬蛋白酶-9(mouse MMP-9)  進口分裝

CLIAKitforIL-16(HumanIerleukin16)ELISAKIT人白介素16

通用型硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitBK大鼠血管舒緩

CD70重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 標簽) Protein

FADD (Fas-associated protein with death domain 0.5mgFADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結構域相關蛋白抗原

ST6GAL1重組人 ST6GAL1 / CD75 蛋白 (His 標簽) Protein

FGF14 Protein Human 重組人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)

TLR3 Protein Mouse 重組小鼠 TLR3 / CD283 蛋白 (His 標簽)

FADD (Fas-associated protein with death domain 0.5mgFADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結構域相關蛋白抗原

FGF14 Protein Human 重組人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)

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小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒

Rat Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白(NGB)檢測試劑盒

humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)檢測試劑盒 進口分裝

HumanarylsulfataseA,ASA檢測試劑盒人芳基酯酶A(ASA)檢測試劑盒

植物源性食品開心果(Pistachio)試劑盒20次

HumahymosinELISAKit人肽(Thymosin)檢測試劑盒

人腹膜微血管內皮細胞無水碳酸鈣   100g

Calciumte,Anhydrous   500g

化鈣   100g

CalciumChloride,Dihydrate   500g

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。