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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中怎么挑選*化的包被條件
點(diǎn)擊次數(shù)：1152 更新時(shí)間：2018-11-01
1.包被抗原的挑選
ELISA試劑盒包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類(lèi)。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被，關(guān)于含雜質(zhì)較多的抗原能夠選用直接捕獲法包被(先用能夠與意圖抗原反響的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上，再經(jīng)過(guò)特異性反響使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比方多肽以及一些小分子有機(jī)化合物，由于分子量太小，往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上，一般都先使其與無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián)，偶聯(lián)物吸附于固相載體上。
2.包被液的挑選
一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，假如包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話，也能夠運(yùn)用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
3.包被溫度的挑選
通常是4-8度條件下24小時(shí)后或許37度保溫2小時(shí)，咱們強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的保持。